Desenvolvimento e validação de metodologias analíticas para análise da cefepima e do metronidazol em plasma e microdialisado peritoneal de ratos Wistar
Data
2022-05-18Autor
Anjos, Michele Vaz dos
Orientador
Tasso, Leandro
Metadata
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A cefepima (CEF) e o metronidazol (MTZ) são dois antimicrobianos que podem ser usados para o tratamento da peritonite secundária. Diferentes metodologias analíticas estão descritas para a quantificação desses analitos em matrizes biológicas, mas não há relatos para a determinação das concentrações livres desses antimicrobianos no fluido peritoneal de ratos. Assim, este estudo tem o objetivo de desenvolver e validar duas metodologias analíticas para medir as concentrações livres desses fármacos no fluido peritoneal de ratos Wistar. Desse modo, para a CEF, foi desenvolvido um método de quantificação empregando a técnica de cromatografia líquida e de detecção por espectrometria de massas de alta resolução com ionização por eletrospray (LC-ESI-QTOF-MS), onde foi empregada uma coluna C18 Shimadzu Shim-pack CLC-ODS (250 mm × 4,6 mm) e uma pré coluna (C18 4 mm, 5 um; Phenomenex). A fase móvel foi composta por (A) água ultrapura com pH a 3,5 e (B) acetonitrila (80:20, v/v). A taxa de fluxo foi de 0,8 mL/min e o volume de injeção de 20 uL. A quantificação foi realizada no modo positivo para monitorar os íons com m/z 481,1311 para CEF e com m/z 171,0283 para o PI. Para o MTZ, a quantificação foi conduzida empregando-se cromatografia líquida de alta eficiência com detecção ultravioleta (CLAE-UV/VIS). A corrida cromatográfica foi realizada em uma coluna C18, com fluxo de 1,6 mL/min a 40ºC, com fase móvel composta por acetonitrila e solução aquosa de tampão fosfato monobásico 50 mM, com 0,1% de trietilamina a pH 3,0 (10:90, v/v). A linearidade foi atingida em ambos os métodos com coeficiente de determinação > 0,99 para as matrizes plasma e fluido peritoneal. Os resultados dos parâmetros de desempenho analítico para os analitos investigados atenderam ao preconizado pelo guia de validação de métodos bioanalíticos da Food and Drug Administration. A aplicabilidade dos métodos foi demonstrada em estudo farmacocinético piloto em ratos Wistar após a administração intravenosa (bolus) de 110 mg/kg de CEF e de 30 mg/kg de MTZ. Para a determinação dos parâmetros farmacocinéticos foi utilizado o software Phoenix versão 6.4. [resumo fornecido pelo autor]