Mutações do gene TP53 em tumores caninos e sua relação com a expressão de genes associados à apoptose, controle de ciclo celular e angiogênese
Resumen
A proteína p53é freqüentemente relacionada às neoplasias humanas e animais, estando
indiretamente relacionada com o bloqueio do ciclo celular, angiogênese e indução à
apoptose. O objetivo deste trabalho foi analisar a presença de alterações no gene TP53,
assim como a expressão dos genes relacionados ao câncer em neoplasias caninas.Tumores
caninos (n=50) foram avaliados através de análise histopatológica, perfis de SSCP dos
exons 5, 6 e 7 e seqüenciamento da região intron5-exon7. Parte destes tumores (45
amostras) foram analisados quanto à expressão dos genes TP53, p21, MDM2, Bax, Bcl2,
IGF-BP3, VEGF e bFGF através de qRT-PCR. Os resultados mostraram que as neoplasias
mamárias, particularmente túbulo-papilares complexas, são as mais comuns em cães. A
ocorrência de neoplasias em cães está relacionada com a idade e a raça. Alta prevalência de
alterações nos perfis de SSCP foi constatada em tumores caninos. Entretanto, esta técnica,
preconizada como eficiente por diversos autores apresenta análise e interpretação
complexa e subjetiva, não apresentando relação com os dados de seqüenciamento no
presente trabalho. Parte dos tumores (42%) apresentaram alterações nos exons 6 e/ou 7 do
gene TP53, e apesar de se encontrarem em heterozigose, podem comprometer
funcionalmente a proteína p53. A única alteração em homozigose foi detectada num
osteossarcoma de mama e correspondeu a uma transição GA no códon 270 (arghis)
conhecido como hotspot situado no domínio de ligação da proteína p53 ao DNA. As
alterações observadas nas sequências nos introns 5 e 6 do gene TP53 não se encontram em
sítios envolvidos no processamento do RNA. Ampla variação na expressão relativa dos
genes TP53, Bax, p21, MDM2, Bcl2, IGF-BP3 e bFGF foi constatada em tumores
mamários e de pele. Entretanto, não foi possível estabelecer relações entre expressão e
alterações no gene TP53, ou entre a expressão dos genes em estudo entre si. O gene IGFBP3foi
hiper ou hipo expresso em 60% dos tumores de pele, mas não apresentou alteração
em tumores de mama. Por outro lado, 82,9% dos tumores mamários apresentaram hiper
expressão do gene Bax, enquanto não foi observada alteração na expressão deste gene em
tumores de pele. Apesar de serem considerados indicadores de prognóstico, de um modo
geral não foi constatada correlação entre o nível de expressão dos genes TP53, Bax, p21,
MDM2, Bcl2, IGF-BP3e bFGF e o grau histopatológico.