Melhoramento genético de Lentinula edodes e Pleurotus sajor-caju para aumento da atividade extracelular de fenol-oxidases e produtividade de basidiomas
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Data
2014-06-12Orientador
Dillon, Aldo José Pinheiro
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Os basidiomicetos Pleurotus sajor-caju e Lentinula edodes despertam grande interesse
industrial devido às propriedades nutritivas e terapêuticas e também devido à capacidade de
secreção de fenol-oxidases, enzimas com grande potencial biotecnológico. O melhoramento
genético torna-se importante para a obtenção de variantes com características de interesse,
podendo ser realizado através de protoplastização e mutagênese. No presente estudo o objetivo
foi a obtenção de clones com maior atividade de fenol-oxidases (com ênfase para as lacases) e
clones com maior produtividade de basidiomas, visando possíveis aplicações biotecnológicas e
industriais. As linhagens P. sajor-caju PS-2001 e L. edodes LE-06 foram submetidas às técnicas
de protoplastização e mutagênese de protoplastos (radiação UV) e por método seletivo foram
isolados clones com maior relação halo/colônia e também com maior diâmetro da colônia em
relação aos parentais. Inicialmente realizou-se cultivo submerso em diferentes meios com o
intuito de identificar uma condição adequada para a secreção de fenol-oxidases pelas linhagens
parentais de L. edodes e P. sajor-caju e neste contexto, o caldo batata dextrose (CBDY)
apresentou resultados satisfatórios para ambas as linhagens. Os clones selecionados, dos dois
fungos, foram cultivados em estado sólido utilizando serragem como substrato e também a
cultivo submerso em meio CBDY para caracterização quanto ao crescimento e secreção de
fenol-oxidases. Adicionalmente, os clones também foram cultivados em sacos contendo
serragem para a avaliação da produtividade de basidiomas. Um dos clones obtidos em P. sajorcaju,
mutante PS UV22, apresentou secreção 1,5 vezes maior de lacases, em relação à linhagem
parental em cultivo sólido. Outro mutante, PS UV56, apresentou secreção 2,1 vezes maior de
lacases, em relação ao parental em cultivo submerso. Com relação à produtividade de
basidiomas, dois clones, (PS3 e PS UV30) apresentaram aumento significativo em relação ao
parental PS-2001. Em L. edodes, foram identificados quatro clones (LE UV6, LE UV9, LE
UV11 e LE UV20), com aumento significativo na atividade de lacases em relação ao parental
LE-06, em cultivo submerso. No cultivo sólido foi selecionado um clone, mutante LE UV23 que
apresentou atividade de lacases 2,6 vezes maior que a parental LE-06. A partir dos resultados
obtidos, é possível afirmar que as técnicas de protoplastização e mutagênese podem ser
utilizadas no melhoramento genético de L. edodes e P. sajor-caju para aumento da atividade
enzimática e produtividade de basidiomas.